Osteoarthritis (OA) mangrupikeun salah sahiji panyakit sendi tulang degeneratif kronis jangka panjang anu mangaruhan populasi yuswa langkung ti 65 taun.
1]. Sacara umum, penderita OA didiagnosis kalawan kartilage ruksak, synovium inflamed, sarta chondrocytes eroded, nu memicu nyeri jeung marabahaya fisik [
2]. Nyeri rematik utamana disababkeun ku degenerasi kartilage dina sendi ku peradangan, sareng nalika kartilage ruksak parah, tulang tiasa saling tabrakan ngabalukarkeun nyeri anu teu kaampeuh sareng kanyeri fisik.
3]. The involvement of mediators radang jeung gejala kayaning nyeri, bareuh, sarta stiffness tina gabungan ieu ogé documented. Dina penderita OA, sitokin radang, anu nyababkeun erosi kartilage sareng tulang subchondral kapanggih dina cairan sinovial [
4]. Dua keluhan utama anu umumna pasien OA nyaéta nyeri sareng peradangan sinovial. Ku alatan éta, tujuan utama terapi OA ayeuna nyaéta pikeun nurunkeun nyeri sareng peradangan. [
5]. Sanaos pangobatan OA anu sayogi, kalebet ubar non-stéroid sareng stéroid, parantos kabuktosan mujarab pikeun ngirangan nyeri sareng peradangan, panggunaan jangka panjang obat-obatan ieu ngagaduhan akibat kaséhatan anu parah sapertos disfungsi kardiovaskular, gastro-peujit, sareng ginjal.
6]. Ku kituna, ubar leuwih éféktif jeung efek samping pangsaeutikna kudu dimekarkeun pikeun pengobatan osteoarthritis.
Produk kaséhatan alami beuki populer sabab aman sareng gampang sayogi [
7]. Ubar tradisional Korea parantos ngabuktikeun khasiatna ngalawan sababaraha panyakit radang, kalebet rematik [
8]. Aucklandia lappa DC. dipikanyaho pikeun sipat ubarna, sapertos ningkatkeun sirkulasi qi pikeun ngaleungitkeun nyeri sareng nenangkeun burih, sareng parantos dianggo sacara tradisional salaku analgesik alami.
9]. Laporan saméméhna nunjukkeun yén A. lappa gaduh anti radang [
10,
11], analgesik [
12], antikanker [
13], sareng gastroprotektif [
14] épék. Rupa-rupa kagiatan biologis A. lappa disababkeun ku sanyawa aktif utama: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone jeung costuslactone [
15]. Panaliti saméméhna nyatakeun yén costunolide nunjukkeun sipat anti-radang dina lipopolysaccharide (LPS), anu ngainduksi makrofag ngaliwatan régulasi NF-kB sareng jalur protéin shock panas.
16,
17]. Sanajan kitu, euweuh ulikan geus ditalungtik kagiatan poténsi A. lappa pikeun pengobatan OA. Panalungtikan ayeuna geus ditalungtik efek terapi A. lappa ngalawan OA ngagunakeun (monosodium-iodoacetate) MIA jeung model rodénsia asam-ngainduksi asam asétat.
Monosodium-iodoacetate (MIA) kasohor dianggo pikeun ngahasilkeun seueur paripolah nyeri sareng ciri patofisiologis OA dina sato.
18,
19,
20]. Nalika nyuntik kana sendi dengkul, MIA ngaganggu métabolisme chondrocyte sareng nyababkeun peradangan sareng gejala radang, sapertos kartilage sareng erosi tulang subchondral, gejala utama OA [
18]. Respon writhing ngainduksi ku asam asétat sacara lega dianggap salaku simulasi nyeri periferal dina sato dimana nyeri radang bisa diukur kuantitatif.
19]. Garis sél makrofag beurit, RAW264.7, umumna dianggo pikeun diajar réspon sélular kana peradangan. Saatos aktivasina sareng LPS, makrofag RAW264 ngaktifkeun jalur radang sareng ngaluarkeun sababaraha perantara radang, sapertos TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, sareng IL-6 [
20]. Ulikan ieu geus dievaluasi efek anti nociceptive jeung anti radang tina A. lappa ngalawan OA dina model sato MIA, model sato asam-ngainduksi asam asétat, jeung sél RAW264.7 LPS-diaktipkeun.
2. Bahan jeung Métode
2.1. Bahan Tutuwuhan
Akar garing tina A. lappa DC. dipaké dina percobaan ieu procured ti Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Hal ieu diidentifikasi ku Prof. Donghun Lee, Dept. of Herbal Pharmacology, Col. of Korean Medicine, Gachon University, sareng nomer spésimén voucher disimpen salaku 18060301.
2.2. Analisis HPLC tina ekstrak A. lappa
A. lappa ieu sasari maké aparat réfluks (cai sulingan, 3 h dina 100 °C). Solusi anu sasari disaring sareng dikondensasi nganggo evaporator tekanan rendah. ekstrak A. lappa miboga ngahasilkeun 44,69% sanggeus freeze-drying handapeun -80 °C. analisis Chromatographic of A. lappa ieu dipigawé ku HPLC disambungkeun maké 1260 Taya WatesⅡ HPLC-sistem (Agilent, Pal Alto, CA, AS). Pikeun pamisahan kromatis, kolom EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) dianggo dina 35 °C. Jumlahna aya 100 mg tina specimen ieu diluted dina 10 ml 50% métanol jeung sonicated pikeun 10 mnt. Sampel disaring nganggo saringan jarum suntik (Waters Corp., Milford, MA, AS) 0,45 μm. Komposisi fase mobile éta 0,1% asam fosfat (A) jeung asetonitril (B) jeung kolom ieu eluted kieu: 0-60 mnt, 0%; 60–65 mnt, 100%; 65–67 mnt, 100%; 67-72 mnt, 0% pangleyur B kalayan laju aliran 1,0 mL / mnt. Efluen dititénan dina 210 nm ngagunakeun volume suntik 10 μL. Analisis dilaksanakeun dina triplicate.
2.3. Perumahan sato jeung Manajemén
Beurit jalu Sprague-Dawley (SD) umur 5 minggu sareng beurit ICR jalu umur 6 minggu dibeuli ti Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Sasatoan disimpen di kamar nganggo suhu konstan (22 ± 2 ° C) sareng kalembaban (55 ± 10%) sareng siklus cahaya / poék 12/12 h. Sato anu familiarized jeung kaayaan pikeun leuwih ti saminggu saméméh percobaan dimimitian. Sato ngagaduhan suplai ad libitum pakan sareng cai. Aturan etika ayeuna pikeun perawatan sareng penanganan sato di Universitas Gachon (GIACUC-R2019003) sacara ketat dituturkeun dina sadaya prosedur ékspérimén sato. Ulikan ieu dirancang investigator-blinded jeung sidang paralel. Urang nuturkeun padika euthanasia nurutkeun tungtunan Panitia Étika Ékspérimén Sato.
2.4. Suntikan MIA sareng Perawatan
Beurit dipisahkeun sacara acak jadi 4 kelompok, nyaéta sham, kontrol, indometasin, jeung A. lappa. Keur anesthetized kalawan 2% campuran isofluorane O2, beurit anu nyuntik maké 50 μL of MIA (40 mg / m; Sigma-Aldrich, St Louis, MO, AS) intra-articularly kana sendi dengkul ngarah kana OA eksperimen. Perlakuan anu dipigawé saperti di handap: kontrol jeung grup sham dijaga ngan ku diet dasar AIN-93G. Ngan, grup indomethacin ieu disadiakeun kalawan indomethacin (3 mg / kg) diasupkeun kana diet AIN-93G jeung A. lappa 300 mg / grup kg ieu ditugaskeun ka diet AIN-93G supplemented kalawan A. lappa (300 mg / kg). Perlakuan dituluykeun salila 24 poé ti poé induksi OA dina laju 15-17 g per 190-210 g beurat awak dina dasar poean.
2.5. Ukuran Bearing Beurat
Saatos induksi OA, pangukuran kapasitas nanggung beurat tina anggota awak beurit dilaksanakeun kalayan incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, AS) sakumaha anu dijadwalkeun. Distribusi beurat dina anggota awak tukang diitung: kapasitas nanggung beurat (%)
